Browsing by Author "Boonsong Sutapan"

Filter results by typing the first few letters
Now showing 1 - 1 of 1
  • No Thumbnail Available
    ItemMetadata only
    Antibody platform for microalbumin detection and ABO blood typing by antibodies arrays based surface plasmon resonance imaging
    (Mahidol University. Mahidol University Library and Knowledge Center, 2023) Nongluck Houngkamhang; Toemsak Srikhirin; Boonsong Sutapan; Pimpun Kitpoka; Mongkol Kunakorn
    ในส่วนที่ 1 เทคนิคเอสพีอาร์ถูกประยุกต์ใช้ในการตรวจวัดปริมาณไมโครอัลบูมินในปัสสาวะ (microalbuminuria) โดยการเปรียบเทียบประสิทธิภาพของการวัดปริมาณอัลบูมิน (HSA) โดยการตรึงแอนติบอดิและการขยายสัญญาณด้วยแอนติบอดิแบบต่าง ๆ บนพื้นผิว mixed self assemble monolayer (mSAM) และ carboxymethyl dextran (CMD) พบว่าพื้นผิวที่เหมาะสมที่สุดคือ พื้นผิว CMD ที่ตรึงด้วยแอนติบอดิ anti-HSA ชนิดโมโนโคลนอล ซึ่งมีความจำเพาะเจาะจงต่อการตรวจด้วย HSA และการขยาย สัญญาณด้วยแอนติบอดิ anti-HSA ชนิดโพลิโคลนอล โดยมีค่าการตรวจดันต่ำที่สุด อยู่ที่ 0.001 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร ปริมาณของ HSA ในปัสสาวะถูกคำนวณโดยใช้ 4PL fitting ซึ่งมีความสามารถในการตรวจวัดอยู่ในช่วง 0.02-2.5 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร ความ เข้มข้นของ HSA ในปัสสาวะที่วัดได้จากเทคนิคเอสพีอาร์สอดคล้องกับวิธีมาตรฐานเดิม (การวัดความขุ่น) โดยมีค่าสัมประสิทธิ์การตัดสินใจ (R2) 0.94 ในส่วนที่ 2 เกี่ยวข้องกับการใช้เทคนิคเอสพีอาร์ในการจำแนกหมู่เลือดชนิดเอบีโอทำโดยตรึง anti-A, anti-B และ anti-AB แอนติบอดิลงบนพิ้นผิว CMD เลือดตัวอย่างถูกไหลผ่านพื้นผิวในลักษณะอาร์เรย์ ซึ่งหมู่เลือดถูกจำแนกแนกจากสัญญาณจำเพาะที่เกิดขึ้นระหว่างคู่แอนติบอดิที่ถูกตรึงและแอนติเจนบนผิวเม็ดเลือดแดง พื้นผิวสามารถล้างและใช้ซ้ำได้อย่างน้อย 20 รอบ ด้วย 5 มิลลิ โมลาร์ โซเดียมไฮดรอกไซด์ เทคนิคเอสพีอาร์ให้ค่าความถูกต้องเหมือนเทคนิคมาตรฐานเดิม ในส่วนที่ 3 เป็นการประยุกต์ใช้เทคนิคเอสพีอาร์สำหรับการตรวจวัดหมู่เลือด Rh (D) โดยการตรึงแอนติบอดิ anti-D ชนิดโมโนโคลนอล ผสมระหว่าง IgG และ IgM ลงบนพื้นผิว CMD จากนั้นเลือดตัวอย่างถูกไหลผ่านพื้นผิวและหมู่เลือด Rh ถูกจำแนกตามการปรากฏของแอนติเจนดีบนพื้นผิวเม็ดเลือดแดง พบว่าอัตราการไหลของเม็ดเลือดแดงที่เหมาะสมอยู่ที่ 10 ไมโครลิตรต่อนาที ซึ่งให้ค่าสัญญาณการวัดหมู่เลือด Rh บวก แตกต่างจากหมู่เลือด Rh ลบอย่างชัดเจน เลือดตัวอย่างทั้งหมด 44 ตั้งอย่างถูกนำมาทดสอบด้วยเทคนิคเอสพีอาร์ พบว่าให้ค่าที่สอดคล้องกันกับเทคนิคมาตรฐานเดิม ส่วนสุดท้ายรวมการตรวจวัดหมู่เลือดชนิดเอบีโอและอาร์เอช บนเซนเซอร์แผ่นเดียวด้วยเทคนิคเอสพีอาร์ รวมถึง ศึกษาเพิ่มเติมในส่วนการตรวจหาแอนติบอดิ anti-A และ anti-B ในพลาสมา (serum grouping) ดว้ ยการตรึงแอนติเจนเอและบี สังเคราะห์บนพื้นผิวเดกทรานซ์ จากนั้นแอนติบอดิและแอนติเจนสำหรับใช้จำแนกหมู่เลือดชนิดเอบีโอและอาร์เอช ถูกตรึงบนพื้นผิว CMD ด้วยสภาวะที่เหมาะสม การจำแนกหมู่เลือดระบบเอบีโอและอาร์เอชในครั้งเดียวโดยการฉีดเลือดตัวอย่างที่ไม่ได้ปั่นแยกที่เจือ จาง 1:5 เท่าใน PBST บัฟเฟอร์ หมู่เลือดเอบีโอและอาร์เอช ถูกจำแนกในคราวเดียวกันภายใน 20 นาที เทคนิคนี้ให้วิธีที่ง่ายและสะดวก สำหรับจำแนกหมู่เลือดระบบเอบีโอและอาร์เอช พร้อมทั้งประหยดเวลาและค่าใช้จ่ายเนื่องจากสามารถล้างพื้นผิวและใช้ซ้ำได้ด้วย 20 มิลลิโมลาร์โซเดียมไฮดรอกไซด์ พื้นผิวสามารถใช้ซ้ำได้อย่างน้อยถึง 10 ครั้ง