Effects of scabraside D on cell viability inhibition and apoptosis promotion of human hepatocellular carcinoma

Abstract

Scabraside D, derived from the sea cucumber Holothuria scabra is a sulfated triterpene glycoside which possess in various biological activities. We assessed the activity of scabraside D and their effects on cell viability and apoptosis on human hepatocellular carcinoma (HepG2) cell lines by MTT assay and staining with Hoechst 33342. The 25 to 100 μg/mL dose of scabraside D significantly decreased the viability of HepG2 cells, in a dose-dependent manner. The treatment with scabraside D at dose 50 and 100 μg/mL significantly also induces morphological changes of apoptotic cell, including cell shrinkage, nuclear chromatin condensation and nuclear fragmentation. Quantitative real-time PCR shows that scabraside D up-regulated Bax and Caspase-3 while down-regulated Bcl-2 expressions in the HepG2 cells in dose-dependent manner. In conclusion, scabraside D can inhibit cell viability and induce apoptosis in HepG2 cells. This study show that scabraside D may be used as a new therapeutic agent for human hepatocellular carcinoma

สคาบราไซด์ ดี (scabraside D) สกัดได้จากปลิงทะเลขาว (Holothuria scabra) คือสาร ซัลเฟตเต็ด ไตรเทอปีน ไกลโคไซด์ สารสกัดนี้ได้แสดงฤทธิ์ทางชีวภาพหลากหลาย การศึกษาครั้งนี้จะประเมินการทำงานของ สคาบราไซด์ ดี และผลต่อการมีชีวิตอยู่ และการตายแบบอะพอพโทซิสต่อมะเร็งตับมนุษย์ (HepG2) โดยวิธี MTT assay และย้อมด้วย Hoechst 33342 พบว่า สคาบราไซด์ ดี ขนาด 25-100 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร สามารถลดการมีชีวิตของเซลล์มะเร็งตับมนุษย์ได้อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ นอกจากนี้ยังพบว่า สคาบราไซด์ ดี จะเหนี่ยวนำทำให้เกิดการตายแบบ อะพอพโทซิส เช่น เซลล์มีลักษณะหดตัว มีการหดตัวและแตกหักของสายโครมาติน ขณะที่ผลของปฏิกิริยาลูกโช่พอลิเมอเราแบบเรียลไทม์ (Quantitative real-time PCR) แสดงให้เห็น สคาบราไซด์ ดี ที่ความเข้มข้น 50 และ 100 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร ส่งผลให้มีการเพิ่มระดับของยีน Bax และ caspase-3 แต่ลดการแสดงออกของยีน Bcl-2 ในเซลล์มะเร็งตับของมนุษย์ สรุปผลการทดลองพบว่า สคาบราไซด์ ดี สามารถยับยั้งการมีชีวิตของเซลล์มะเร็งตับมนุษย์และเหนี่ยวนำทำให้เกิดการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส (apoptosis) อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ การศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นว่า สคาบราไซด์ ดี (scabraside D) อาจสามารถใช้เป็นสารใหม่ที่ใช้ในการรักษามะเร็งตับในมนุษย์ได้