การพัฒนา Diploid cells จากเซลล์เหงือกของปลาคาร์พ เพื่อใช้ในการแยกเชื้อไวรัสคอยเฮอร์ปีส์

Abstract

การติดเชื้อไวรัสคอยเฮอร์ปีส์ (Koi herpesvirus; KHV) เป็นสาเหตุสำคัญของการป่วยและการตายของปลาคาร์พ (fancy carp หรือ koi; Cyprinus carpio koi) และปลาไน (common carp; Cyprinus carpio) การพัฒนาเซลล์เพาะเลี้ยงอย่างต่อเนื่อง (cell-line) เพื่อใช้สำหรับแยกเชื้อจึงมีความสำคัญต่อการวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการและการศึกษาวิจัย งานวิจัยนี้ได้พัฒนา diploid cell-line จากเหงือกของปลาคาร์พ (Koi gill or KG cells) ขึ้นมาและทำการทดสอบใช้ KG cells ที่ passage 29 และ 33 สำหรับการแยกเชื้อไวรัส KHV และเพาะเลี้ยงเชื้อแบบต่อเนื่องจาก KG cells (passage 29-30) และจาก KG cells (passage 33-34) น้ำเลี้ยงเซลล์ของการเลี้ยงไวรัสในแต่ละรอบในเซลล์ ได้นำไปตรวจหาเชื้อเพื่อยืนยัน โดยวิธี polymerase chain reaction ผลการตรวจพบว่าการใช้ KG cells สามารถใช้สำหรับการแยกเชื้อ KHV ได้ โดยตรวจพบเชื้อ KHV ได้จากทั้ง 2 รอบของการแยกเชื้อ (passage) ต่อเนื่องกันใน KG cells ดังนั้น KG cells จึงเป็นเซลล์ที่เป็นทางเลือกหนึ่งสำหรับนำมาใช้ในการตรวจวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการโดยการแยกเชื้อและเพาะเลี้ยงไวรัส (viral isolation) ได้

Koi herpesvirus (KHV) is a cause of morbidity and mortality in fancy carp (koi; Cyprinus carpio koi) and common carp (Cyprinus carpio). The development of diploid cells for viral isolation is important for laboratory diagnosis and research. In this study, KHV was cultured consecutively in koi gill (KG) cells of passage 29 - 30 and 33 - 34. The fluid from each passage was tested for KHV by polymerase chain reaction technique and positive result was found in both passages. Thus, KG cells can provide a positive result to KHV isolation at 25oC and this can be confirmed by PCR.