การเหนี่ยวนำเซลล์เดี่ยวแตกตายเองในเซลล์มะเร็งช่องปากชนิดสความัสด้วยสารสกัดกระชาย

Abstract

วัตถุประสงค์: กระชายเป็นพืชสมุนไพรที่มีฤทธิ์ต้านสมบัติกลายพันธุ์และเป็นพิษต่อเซลล์มะเร็งหลายสายพันธุ์วัตถุประสงค์ของการวิจัยนี้เพื่อศึกษาผลของสารสกัดกระชายต่อการเหนี่ยวนำกระบวนการเซลล์เดี่ยวแตกตายเองในเซลล์ วัสดุอุปกรณ์และวิธีการศึกษา: เพาะเซลล์มะเร็งช่องปากชนิดสความัสสายพันธุ์เอชเอสซ-4 ในอาหารเพาะเลี้ยงชนิดดีเอ็มอีเอ็ม แบ่งกลุ่มการทดลองเป็น 3 กลุ่ม คื กลุ่มควบุมเชิงลบ กลุ่มทดสอบด้วยสารสกัดกระชาย และกลุ่มควบคุมเชิงบวกทดสอบด้วย 5-ฟลูโอยูราซิล เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ศึกษาลักษณะของเซลล์ด้วยกล้องจุลทรรศน์หัวกลีบวัฏีภาคและกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด ตรวจสอบเซลล์เดี่ยวแตกตายเองด้วยการย้อมโพรพิเดียมไอโอไดด์ร่วมกับโฮชสท์ 33342 และวิธีทูเนล ผลการศึกษา: การศึกษาภายใต้กล้องจุลทรรศน์หัวกลีบวัฏีภาคและกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราดพบว่าเซลล์ในกลุ่มที่ทดสอบด้วยสารสกัดกระชาย และ 5-ฟลูโอยูราซิล หดกลม สูญเสียการยึดต่อระหว่างเซลล์ ในขณะที่เซลล์ในกลุ่มควบคุมเชิงลบมรูปร่างปกติ เป็นรูปหลายเหลี่ยมยึดติดกับเซลล์ข้างเคียง การย้อมโพรพิเดียมไอโอไดด์ร่วมกับโฮชสท์ 33342 และวิธีทูเนลและวิธีทูเนลพบลักษณะการเปลี่ยนแปลงของเซลล์เดี่ยวแตกตายเองในกลุ่มที่ทดสอบสารสกัดกระชายและ 5-ฟลูโอยูราซิล ขณะที่กลุ่มควบคุมเชิงลบย้อมติดเฉพาะโฮชสท์ 33342 และแสดงผลลบเมื่อตรวจสอบด้วยวิธีทูเนล บทสรุป: สารสกัดกระชายสามารถเหนี่ยวนำช่องปากชนิดสความัสสายพันธุ์เอชเอสซ-4 ตายผ่านกระบวนการเซลล์เดี่ยวแตกตายเองได้

Objective: Boesenbergia pandurata has been documented to possess the antimutagenicity and cytotoxicity on a variety of cancer cells but little is known about its apoptotic inductive potential. This study was aimed to examine whether Boesenbergia pandurata crude extract can induce the apoptosis in oral squamous carcinoma cell line, HSC-4. Materials and methods: HSC-4 cells were plated in DMEM completed medium, and then allocated into 3 groups; 1) cells cultured in DMEM complete medium as a negative control group, 2) cells treated with Boesenbergia pandurata extract as a test group and 3) cells treated with 5-fluouracil as a positive control group. After 24 hours of incubation, apoptosis-related cytomorphologic changes were observed using phase contrast inverted and scanning electron microscopes. The characteristics of apoptosis were also detected by double staining of propidium iodide and Hoechst 33342 and further supported with TUNEL method. Results: Under phase-contrast inverted and scanning electron microscopes, such consistent apoptotic hallmark as cell shrinkage, membrane protrusion with loss of adjacent cell adhesion were noticed in Boesenbergia pandurata and 5-fluouracil treated groups while negative control cells exhibited normal morphological features. Double staining and TUNEL methods revealed apoptosis-like nuclei of Boesenbergia pandurata and 5-fluouracil treated cells. Conversely, only Hoechst 33342 stained nuclei subsequent to double staining as well as negative TUNEL method had been obtained in untreated cells. Conclusion: Boesenbergia pandurata extract can induce HSC-4 cell death via the apoptosis mechanism, in vitro.