Isolation and characterization of peptide antibiotics produced by bacillus subtilis

Abstract

Bacillus subtilis NP-210, isolated from starch waste collected from Nakhon Pathom province Thailand, was used as producer for the antibacterial substances named BT 111. BT 111 were isolated from fermentation broth by precipitation with organic solvent. Further purification was achieved by PLC. HPLC analysis showed that BT 111 were a complex composed of two components. One of the components was called BT 111 A and the other was called BT 111 B. Chemical characterization of the components indicated that they were peptides. Amino acid analysis of the acid hydrolysates of BT 111 revealed the presence of glycine (Gly), glutamic acid (Glu), and Leucine (Leu). They are active against both gram-positive, and particularly gramnegative bacteria. It was partially stable to heat, and active over a wide range of pH values

Bacillus subtilis NP-210 เป็น Bacillus subtilis สายพันธุ์ที่แยกได้จากแป้งเสียจากโรงงานผลิต แป้งแห่งหนึ่งในจังหวัดนครปฐม ประเทศไทย ซึ่งพบว่าเชื้อ ดังกล่าวสามารถสร้างสารประเภทเปปไทด์ มีคุณสมบัติเป็น สารปฏิชีวนะ มีชื่อเรียกว่า BT 111 สามารถฆ่าเชื้อได้ ทั้งแกรมบวกและแกรมลบได้ดี สารปฏิชีวนะ BT 111 ถูกแยก และทำให้บริสุทธิ์ด้วยวิธีทางเคมี โดยตกตระกอนด้วยตัว ทำละลายอินทรีย์ จากนั้นจึงทำให้บริสุทธิ์ต่อด้วย PLC และ HPLC ตามลำดับ พบว่าสารปฏิชีวนะ BT 111 นี้ ประกอบ ด้วยสารที่เป็นองค์ประกอบร่วมกันสองสารคือ BT 111 A และ BT 111 B จากการศึกษาทางเคมีพบว่าสารปฏิชีวนะ BT 111 นี้ประกอบด้วย กรดอะมิโน สามชนิด คือ ไกลซีน, กรดกลูตามิก และลูซีน นอกจากนี้ สารดังกล่าวค่อนข้างทน ต่อความร้อนและทนต่อความเป็นกรดด่างได้ในช่วง pH ค่อนข้างกว้าง