Characterization of proteome of plasmodium vivax erythrocytic stages and the identification of asexual stage antigens

Abstract

จากการที่มีข้อมูลจีโนมของเชื้อก่อโรคมาลาเรียชนิด Plasmodium vivax แล้วนั้น การศึกษาProteome ของเชื้อก็มีความสำคัญในแง่ของการหาโปรตีนที่มีคุณสมบัติเป็น antigen รวมถึง drug targets ชนิดใหม่ ในขณะที่วิธีการเลี้ยงเชื้ออย่างต่อเนื่องภายในห้องปฏิบัติการยังไม่ ประสบผลสำเร็จ เราได้ทำการศึกษา proteome ในระยะ erythrocytic stage ของเชื้อ P. vivax ที่ได้ จากผู้ป่วย โดยนำเชื้อที่ได้มาทำการวิเคราะห์หาชนิดของโปรตีนทั้งหมดด้วยเครื่อง Tandem mass spectrometry โดยจากการศึกษาพบโปรตีนทั้งหมด 316 ตัว โดยเกือบร้อยละ 50 ของโปรตีนที่พบนี้ เป็น hypothetical protein นอกนั้นเป็นโปรตีนที่ทำหน้าที่ในเรื่องของ binding function, protein fate, protein synthesis, metabolism และ cellular transport เพื่อค้นหาโปรตีนของเชื้อ P. vivax ที่ถูกจดจำด้วยระบบภูมิคุ้มกันของมนุษย์ โปรตีน ทั้งหมดของเชื้อได้ถูกนำมาแยกตามคุณสมบัติของค่า pI และน้ำหนักของโปรตีนด้วยวิธี 2D gel electrophoresis แล้วนำโปรตีนที่แยกได้นั้นมาทำปฏิกิริยากับ plasma ผู้ป่วยที่ติดเชื้อ P. vivax ด้วย วิธี immunoblotting และทำการวิเคราะห์หาชนิดโปรตีนด้วยเครื่อง mass spectrometry โดยพบว่ามี โปรตีนทั้งหมด 4 ชนิดที่ถูกจดจำโดยแอนติบอดีจาก plasma ผู้ป่วย หนึ่งในนั้นคือ PV24 ซึ่งจาก การศึกษาพบว่าโปรตีนชนิดนี้ถูกจดจำโดยระบบภูมิคุ้มกันของผู้ป่ วยที่อาศัยอยู่ในแหล่งระบาดของโรค