Staining of brain slices prior to plastination

Abstract

Human brain slices were stained before being plastinated. Five methods of macroscopic staining were compared: 1) Mulligans method 2) Le Masuriers method 3) Roberts method 4) Braaks method and 5) Alstons method. After staining with the five methods, the grey matter was grey-black, brilliance-blue, light brown, bluish-green and brick-red, respectively. Due to the oxidation reaction of the performic acid, sections stained by Braaks method suffered shrinkage by 2%, while other methods revealed less than 1%. After plastination, the shrinkage of stained sections by all the methods was less than 10% and showed no difference among methods. It was found that chemicals used in the staining process did not affect the quality of plastination. Judging by economic cost, time used and the contrast between the grey and white matters contrastion, Alstons method was the best among the five methods for macroscopic staining of serial brain sections prior to plastination.

จากการศึกษาการย้อมมีแผ่นสมองขนาดความหนา 4 มิลลิเมตร แล้วตามด้วยกรรมวิธีการกำซาบด้วยสารพลาสติก นั้น ได้มีการเปรียบเทียบวิธีการย้อมสีทั้งหมด 5 วิธี คือ 1) วิธีการของ Mulligan 2) วิธีการของ Le Masurier 3) วิธีการของ robert 4) วิธีการของ Braak 5) วิธีการของ Alston โดยทุกวิธีเป็นการย้อมสีบนเนื้อเยื่อสีเทาและ นิวเคลียสต่าง ๆ ทำให้เกิดสีเทาดำ สีน้ำเงินเข้ม สีน้ำตาลอ่อน สีเขียวไข่กา และสีแดงอิฐตามลำดับ บนเนื้อเยื่อสีเทาเกือบ ทุกวิธีภายหลังการย้อมสี จะมีการหดตัวของแผ่นสมองน้อย กว่า 1 เปอร์เซ็นต์ ยกเว้นวิธีของ Braak เท่านั้นที่ทำให้ เกิดการหดตัวถึง 2 เปอร์เซ็นต์ การหดตัวที่มากกว่าวิธี อื่นอาจเกิดขึ้นเพราะว่าวิธีการย้อมวิธีนี้จะต้องมีการ อ๊อกซิไดส์แผ่นสมองด้วยกรดเปอร์ฟอร์มิกเข้มข้น และเมื่อ นำแผ่นสมองที่ได้รับการย้อมสีแล้วไปผ่านกระบวนการกำซาบ การหดตัวของแผ่นสมองจะน้อยกว่า 10 เปอร์เซ็นต์ ซึ่งไม่ แตกต่างจากแผ่นสมองที่ไม่ได้ผ่านการย้อมสี สรุปได้ว่า สารเคมีที่ใช้ในการย้อมสีดังกล่าวข้างต้นทั้ง 5 วิธี ไม่ได้เป็นตัวขัดขวางกระบวนการกำซาบด้วยสารพลาสติก อัตราการหดตัวของแผ่นสมอง ที่ย้อมสีแล้วผ่านกระบวนการ กำซาบนั้น จะขึ้นอยู่กับขั้นตอนการกำซาบด้วยสารพลาสติก มากที่สุด จากการศึกษาครั้งนี้พบว่าวิธีการของ Alston เป็นวิธีที่เหมาะสมกับการย้อมสีสมอง เพราะเป็นวิธีที่ สะดวกรวดเร็ว ค่าใช้จ่ายน้อยและการแบ่งแยกระหว่าง เนื้อเยื่อทั้งสองเป็นไปอย่างชัดเจน