Expression of leptospiral recombinant protein for serodiagnosis
1
Issued Date
2009
Copyright Date
2009
Resource Type
Language
eng
File Type
application/pdf
No. of Pages/File Size
xv,147 leaves : col. ill.
Access Rights
open access
Rights
ผลงานนี้เป็นลิขสิทธิ์ของมหาวิทยาลัยมหิดล ขอสงวนไว้สำหรับเพื่อการศึกษาเท่านั้น ต้องอ้างอิงแหล่งที่มา ห้ามดัดแปลงเนื้อหา และห้ามนำไปใช้เพื่อการค้า
Rights Holder(s)
Mahidol University
Bibliographic Citation
Thesis (M.Sc. (Tropical Medicine))--Mahidol University, 2009
Suggested Citation
Piyanart Chalayon Expression of leptospiral recombinant protein for serodiagnosis. Thesis (M.Sc. (Tropical Medicine))--Mahidol University, 2009. Retrieved from: https://repository.li.mahidol.ac.th/handle/123456789/96332
Title
Expression of leptospiral recombinant protein for serodiagnosis
Alternative Title(s)
การผลิตโปรตีนของเชื้อเลปโตสไปราโดยเทคนิคทางอณุชีววิทยาเพื่อใช้ในการวินิจฉัยโรค
Author(s)
Abstract
กระบวนการตรวจวินิจฉัยโรคเลปโตสไปโรซีสต้องอาศัยวิธีการทางห้องปฏิบัติการ การตรวจโดยวิธี MAT เป็นวิธีมาตรฐาน แม้ว่าจะไม่สามารถตรวจได้ในห้องปฏิบัติการทั่วไป เนื่องจากต้องเพาะเลี้ยงเชื้อ โปรตีนบนผิวเซลล์ของเชื้อเลปโตสไปโรซีสมีความสามารถในการกระตุ้นระบบภูมิคุ้มกันของร่างกายได้ดี จึงเป็นแอนติเจนที่สำคัญเนื่องจากมีความสัมพันธ์กับการติดเชื้อ โปรตีน LipL32, LipL41 และ Loa22 เป็น แอนติเจนซึ่งถูกเลือกมาศึกษา และถูกโคลนเข้าสู่เวคเตอร์ pRSET-B รีคอมบิแนนท์โปรตีนที่ผลิตได้เพิ่ม จำนวนในเชื้อ E. coli และทำให้บริสุทธ์โดยใช้ Nikle affinity column รีคอมบิแนนท์โปรตีน LipL32, LipL41 และ Loa 22 มีขนาด 35, 27 และ 27 kDa ตามลำดับ รีคอมบิแนนท์โปรตีนทั้งสามชนิดถูกนำมา ทดลองเบื้องต้นโดยการทำปฏิกิริยากับซีรั่มที่มีผล MAT เป็นบวกโดยวิธี Western blot พบว่า รีคอม บิแนนท์โปรตีน LipL32 เท่านั้นที่มีปฏิกิริยา รีคอมบิแนนท์โปรตีนทั้งสามได้ถูกนำมาฉีดหนูเพื่อกระตุ้น การสร้างแอนติบอดี ซีรั่มหนูที่ได้สามารถทำปฏิกิริยากับเชื้อเลปโตสไปราบางสายพันธุ์ ซึ่งทำให้เห็นว่ารี คอมบิแนนท์โปรตีนทั้งสามชนิดมีคุณสมบัติเหมือนกับเชื้อเลปโตสไปรา รีคอมบิแนนท์โปรตีนถูกนำมา ทดสอบในการตรวจหา IgM และ IgG ด้วยวิธี ELISA เพื่อเปรียบเทียบกับวิธีการ MAT โดยใช้ซีรั่มคนไข้ที่ มีผล MAT เป็นบวก ซีรั่มที่จากคนที่สงสัยว่าเป็นเลปโตสไปโลซีสแต่ผล MAT เป็นลบ ซีรั่มคนปกติ และ ซีรั่มของคนไข้กลุ่มโรค febrile illness เช่น Scrub typhus, ไข้เลือดออก และ Melioidosis รีคอมบิแนนท์ โปรตีน LipL32 เป็นโปรตีนที่มีความจำเพาะต่อโรคเลปโตสไปโรซีศสูงที่สุด คือ 89 เปอร์เซ็นต์และ สามารถวินิจฉัยแยกโรคเลปโตสไปโรซีสจากโรค Melioidosis ในขณะที่มีเปอร์เซนต์ต่ำในกลุ่มซีรั่มคน ปกติ ส่วนกลุ่มคนที่เป็นเลปโตสไปโลซีสแต่ผล MAT เป็นลบ รีคอมบิแนนท์โปรตีน LipL32 สามารถ ตรวจพบว่าเป็นโรคได้ถึง 43 เปอร์เซ็นต์
Description
Tropical Medicine (Mahidol University 2009)
Degree Name
Master of Science
Degree Level
Master's degree
Degree Department
Faculty of Tropical Medicine
Degree Discipline
Tropical Medicine
Degree Grantor(s)
Mahidol University