Antiproliferative effect on liver cancer cells of dipterocarpus obtusifolius root
8
Issued Date
2016
Copyright Date
2016
Resource Type
Language
eng
File Type
application/pdf
No. of Pages/File Size
xviii, 141 leaves : ill.
Access Rights
open access
Rights
ผลงานนี้เป็นลิขสิทธิ์ของมหาวิทยาลัยมหิดล ขอสงวนไว้สำหรับเพื่อการศึกษาเท่านั้น ต้องอ้างอิงแหล่งที่มา ห้ามดัดแปลงเนื้อหา และห้ามนำไปใช้เพื่อการค้า
Rights Holder(s)
Mahidol University
Bibliographic Citation
Thesis (M.Sc. (Pharmaceutical Chemistry and Phytochemistry))--Mahidol University, 2016
Suggested Citation
Woranan Chancherdlha Antiproliferative effect on liver cancer cells of dipterocarpus obtusifolius root. Thesis (M.Sc. (Pharmaceutical Chemistry and Phytochemistry))--Mahidol University, 2016. Retrieved from: https://repository.li.mahidol.ac.th/handle/123456789/93310
Title
Antiproliferative effect on liver cancer cells of dipterocarpus obtusifolius root
Alternative Title(s)
ผลการยับยั้งเซลล์มะเร็งตับของรากเหียง
Author(s)
Advisor(s)
Abstract
Dipterocarpus obtusifolius Teijsm. ex Miq. (local name : Hiang) is a dipterocarpaceous plant. In Thailand, D. obtusifolius root has been used in traditional Thai medicine for the ailments caused by liver cancer. This study aimed to investigate the plant substance with the antiproliferative effect on liver cancer and quantitate it using high-performance liquid chromatography (HPLC). The study began with the isolation of the plant substance from the dichloromethane root extract using silica gel column, with a gradient mobile phase of CH2Cl2/MeOH. The substances DO-1 and DO-2 were isolated. The structures of both compounds were elucidated using spectroscopic analyses. The results revealed that DO-1 was ursolic acid (C30H48O3) with relative molecular mass (Mr) of 456.70 and DO-2 was [beta]-sitosteryl glucoside (C35H60O6) with relative molecular mass (Mr) of 576.44. The antiproliferative effect of DO-1, ethanolic and water root extracts were performed on two liver cancer cell lines (Hep3B and C3A). The results showed the significant antiproliferative activities of DO-1 and ethanolic root extract against Hep3B with ED50 296.42 and 72.75 µg/mL, respectively. In addition, DO-1 showed the antiproliferative activity against human dermal fibroblast (HDF) with ED50 of 52.23 µg/mL. Quantitative analysis by HPLC of DO-1 was established and validated. The optimum HPLC system comprised Hypersil C-18 reversed phase column (250x4.6 mm, i.d. 5 μm), mobile phase using isocratic elution with methanol and 0.2% ammonium acetate in water (83:17), UV detection at 215 nm. The retention time of ursolic acid was 18.9 min. The result showed that the content of ursolic acid (DO-1) in D. obtusifolius root was 0.0047% w/w.
Dipterocarpus obtusifolius Teijsm. ex Miq. ชื่อท้องถิ่น : เหียง เป็นพืชในวงศ์ยาง (Dipterocarpaceae) ในประเทศไทย รากเหียงใช้เป็นส่วนประกอบในตำรับยารักษามะเร็งตับ การศึกษานี้จึงมีจุดประสงค์เพื่อทำการพิสูจน์สารต้านเซลล์มะเร็งตับจากรากเหียง และวิเคราะห์ ปริมาณสารดังกล่าวโดยเทคนิค high performance liquid chromatography (HPLC) การศึกษาเริ่มจากการสกัดแยกสารจากรากเหียงด้วยคอลัมภ์ซิลิกาเจล โดยใช้ไดคลอโรมีเทนและเมทานอลเป็น gradient mobile phase สามารถแยกสารได้ 2 ชนิด ซึ่งเมื่อนำไปพิสูจน์โครงสร้างด้วยวิธีทางสเปกโทรสโกปี พบว่าสาร DO-1 คือ ursolic acid (C30H48O3) มีมวลโมเลกุล (Mr) 456.70 และสาร DO-2 คือ β-sitosteryl glucoside (C35H60O6) มีมวลโมเลกุล (Mr) 576.44 เมื่อทำการทดสอบฤทธิ์ยับยั้งเซลล์มะเร็งตับ (Hep3B และ C3A) ของสาร DO-1, สารสกัดเอทานอลและสารสกัดน้ำของรากเหียง พบว่า สาร DO-1 และสารสกัดเอทานอลของรากเหียง แสดงฤทธิ์ยับยั้ง Hep3B อย่างมีนัยสำคัญด้วยค่า ED50 296.42 µg/mL และ 72.75 µg/mL ตามลำดับ นอกจากนี้สาร DO-1 ยังแสดงฤทธิ์ยับยั้งเซลล์ผิวหนังปกติ (HDF) ด้วยค่า ED50 52.23 µg/mL จากการประเมินวิธีวิเคราะห์ (method validation) พบว่าสภาวะที่เหมาะสมในการวิเคราะห์ปริมาณสาร DO-1 ด้วยวิธี HPLC ประกอบด้วยคอลัมภ์ C-18 Hypersil (250x4.6 mm, i.d. 5 µm) ใช้เมทานอลและสารละลาย 0.2% แอมโมเนียมอะซีเตต เป็นวัฏภาคเคลื่อนที่ อัตราส่วน 83:17, ตรวจวัด UV ที่ความยาวคลื่น 215 นาโนเมตร retention timeของ ursolic acid ปรากฏที่ 18.9 นาที จากการวิเคราะห์ปริมาณ ursolic aid ในรากเหียง พบว่ามีปริมาณ ursolic acid 0.0047% w/w
Dipterocarpus obtusifolius Teijsm. ex Miq. ชื่อท้องถิ่น : เหียง เป็นพืชในวงศ์ยาง (Dipterocarpaceae) ในประเทศไทย รากเหียงใช้เป็นส่วนประกอบในตำรับยารักษามะเร็งตับ การศึกษานี้จึงมีจุดประสงค์เพื่อทำการพิสูจน์สารต้านเซลล์มะเร็งตับจากรากเหียง และวิเคราะห์ ปริมาณสารดังกล่าวโดยเทคนิค high performance liquid chromatography (HPLC) การศึกษาเริ่มจากการสกัดแยกสารจากรากเหียงด้วยคอลัมภ์ซิลิกาเจล โดยใช้ไดคลอโรมีเทนและเมทานอลเป็น gradient mobile phase สามารถแยกสารได้ 2 ชนิด ซึ่งเมื่อนำไปพิสูจน์โครงสร้างด้วยวิธีทางสเปกโทรสโกปี พบว่าสาร DO-1 คือ ursolic acid (C30H48O3) มีมวลโมเลกุล (Mr) 456.70 และสาร DO-2 คือ β-sitosteryl glucoside (C35H60O6) มีมวลโมเลกุล (Mr) 576.44 เมื่อทำการทดสอบฤทธิ์ยับยั้งเซลล์มะเร็งตับ (Hep3B และ C3A) ของสาร DO-1, สารสกัดเอทานอลและสารสกัดน้ำของรากเหียง พบว่า สาร DO-1 และสารสกัดเอทานอลของรากเหียง แสดงฤทธิ์ยับยั้ง Hep3B อย่างมีนัยสำคัญด้วยค่า ED50 296.42 µg/mL และ 72.75 µg/mL ตามลำดับ นอกจากนี้สาร DO-1 ยังแสดงฤทธิ์ยับยั้งเซลล์ผิวหนังปกติ (HDF) ด้วยค่า ED50 52.23 µg/mL จากการประเมินวิธีวิเคราะห์ (method validation) พบว่าสภาวะที่เหมาะสมในการวิเคราะห์ปริมาณสาร DO-1 ด้วยวิธี HPLC ประกอบด้วยคอลัมภ์ C-18 Hypersil (250x4.6 mm, i.d. 5 µm) ใช้เมทานอลและสารละลาย 0.2% แอมโมเนียมอะซีเตต เป็นวัฏภาคเคลื่อนที่ อัตราส่วน 83:17, ตรวจวัด UV ที่ความยาวคลื่น 215 นาโนเมตร retention timeของ ursolic acid ปรากฏที่ 18.9 นาที จากการวิเคราะห์ปริมาณ ursolic aid ในรากเหียง พบว่ามีปริมาณ ursolic acid 0.0047% w/w
Description
Pharmaceutical Chemistry and Phytochemistry (Mahidol University 2016)
Degree Name
Master of Science
Degree Level
Master's degree
Degree Department
Faculty of Pharmacy
Degree Discipline
Pharmaceutical Chemistry and Phytochemistry
Degree Grantor(s)
Mahidol University